Набор для диагностики токсоплазмоза животных в рск рдск

по лабораторной диагностике

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1.1. Токсоплазмоз – протозойное заболевание животных и человека, вызываемое внутриклеточным паразитом (toxoplasma gondii), протекает остро и хронически. Заболевание животных токсоплазмозом наблюдают в любое время года.

Болезнь регистрируется во всех странах мира.

1.2. Развитие возбудителя проходит в организме дефинитивного и промежуточного хозяев.

1.3. Дефинитивными хозяевами токсоплазмы являются кошка, рысь, оцелот, пума и другие кошачьи; промежуточными – домашние и дикие млекопитающие (грызуны, плотоядные, всеядные, насекомоядные, сумчатые, птицы, приматы и человек), известно около 350 видов.

1.4. Диагноз на токсоплазмоз ставят на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований (микроскопического, биологического, серологического и копрологического).

1.5. В лабораторию для исследования на токсоплазмоз направляют:- от подозрительных животных (бесплодие невыясненной этиологии, аборты, рождение уродливых, нежизнеспособных плодов), пробы сывороток крови (1-2 куб.см нативной или консервированной 5%-ным раствором фенола (1 капля на 1 куб.см сыворотки) или сухой борной кислотой (2-4% к объему), мертворожденный или

абортированный плод (от серопозитивного или серосомнительного животного) целиком или его паренхиматозные органы, головной мозг, глаза и кусочки плаценты;- от павших или вынуждено убитых – сердце, легкие, печень, селезенку, почки, лимфатические узлы и головной мозг;- от кошек – пробы фекалий.

1.6. Отобранный патологический материал и пробы фекалий во влаго-непроницаемой таре доставляют в лабораторию в день отбора, сыворотку крови — не позднее 2 дн. с момента взятия, абортированный или мертворожденный плод – не позднее 12ч после аборта или рождения. Через сутки после смерти процент обнаружения возбудителя резко снижается.

1.7. Лабораторные исследования на токсоплазмоз включает:- обнаружение эндозоитов, цист в патологическом материале и ооцист токсоплазмы в фекалиях методом световой микроскопии;

– выделение эндозоитов или цист токсоплазмы на белых мышах с последующей дифференциацией возбудителей;

2. МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

2.1. Из патологического материала делают по 2 мазка. При исследовании абортированного плода делают мазки из сердца, легких, печени, почек, селезенки, лимфатических узлов, мышц глаза и экссудата грудной и брюшной полостей.

Жидкий материал наносят стерильной пипеткой на предметное стекло, размазывают и сушат на воздухе. Экссудат грудной и брюшной полостей предварительно центрифугируют при 2000 об/мин в течение 15 мин и мазки готовят из осадка. При исследовании плаценты делают разрез котиледона и делают мазки-отпечатки.

2.2. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют этиловым спиртом в течение 10-15 мин, окрашивают по Романовскому (1-2 капли краски азур-эозина на 1 куб.см дистиллированной воды рН 7,0-7,2) в течение 30-60 мин (зависит от качества краски), промывают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и исследуют под иммерсионной системой микроскопа.

2.3. При микроскопии препаратов эндозоиты токсоплазмы имеют форму дольки апельсина (полумесяца) с заостренным передним концом. Цитоплазма эндозоитов окрашивается в голубой цвет различной интенсивности, ядро – в красный или красно-фиолетовый.

В клетках разных органов путем размножения эндозоитов (до нескольких десятков) формируются псевдоцисты, не имеющие собственной оболочки. Наличие эндозоитов характерно для острой стадии токсоплазменного процесса.

В мазках из головного мозга, сетчатки глаза и мышечных органах обнаруживают цисты шарообразной формы около 100 мкм в диаметре, окружены плотной оболочкой. В них могут находиться сотни и тысячи цистозоидов. Цисты могут быть и вне клеток. Наличие цист характерно для хронического течения токсоплазмоза.

2.4. Результат микроскопического исследования считают положительным при обнаружении в мазках эндозоитов или цист токсоплазмы.

3. БИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

3.1. Для биологической пробы используют тот же материал, что и для микроскопического исследования. Возбудитель выделяют методом слепых пассажей на белых мышах.

3.2. Материал растирают в ступке со стерильным песком и заливают физиологическим раствором в соотношении 1:3 или 1:5. Плаценту предварительно обрабатывают тампонами, смоченными дезинфицирующим раствором, подсушивают сухими стерильными тампонами, затем вырезают кусочки размером 0,5х0,5 см, фламбируют их на пламени горелки и растирают в ступке. В полученную суспензию добавляют антибиотики из расчета 1000 ЕД пенициллина и 0,05 г стрептомицина на 1

см3 суспензии. Суспензию выдерживают 1 ч при комнатной температуре. Перед заражением суспензию встряхивают, когда частички осядут на дно, набирают надосадочную жидкость и вводят 2-3 белым мышам весом 20-23 г внутрибрюшинно или подкожно в дозе 0,5-1 куб.см. Суспензию можно набирать шприцом через стерильный ватный тампон. Место инъекции обрабатывают 7%-ной настойкой йода на 96° этиловом спирте.

3.3. С целью обогащения материала цистами применяют метод искусственного переваривания в желудочном соке. Патологический материал (кусочки внутренних органов, плаценты, мышц) тщательно измельчают, 50 г фарша помещают в колбу емкостью 1 куб.дм и заливают 10 объемами (по массе) искусственного желудочного сока следующего состава: пепсин – 1,3 г, натрий хлорид – 2,5 г, кислота соляная концентрированная – 3,5 куб.см, вода дистиллированная – 500 куб.см. Колбу помещают в термостат при 36°С на 1 или 1,5 часа, периодически встряхивая.

Полученную массу центрифугируют при 2000 об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость осторожно сливают, осадок промывают стерильным физиологическим раствором, ресуспендируют в двойном объеме этого же раствора и после добавления антибиотиков выдерживают 1 ч при комнатной температуре и вводят внутрибрюшинно 2-3 белым мышам в дозе 1 куб.см.

3.4. При наличии в материале токсоплазм животные гибнут в течение 7-10 дней. У павших от токсоплазмоза мышей в брюшной полости образуется экссудат, в котором содержится большое количество эндозоитов токсоплазмы. Возбудитель обнаруживают также в мазках-отпечатках из печени, селезенки, легких, почек, лимфатических узлов.

3.5. Если в указанные сроки белые мыши, зараженные исходным материалом, не заболевают, их убивают на 10-й день, из паренхиматозных органов готовят суспензию (см. п.3.2.), которой заражают 2-3 белых мышей (второй пассаж). Если мыши не гибнут, аналогично проводят третий пассаж. При вскрытии мышей могут обнаружить в экссудате и паренхиматозных органах эндозоитов, а в головном мозге – цисты токсоплазмы.

3.6. Для подавления резистентности белых мышей во втором и третьем пассажах им рекомендуется вводить гидрокортизон внутримышечно в дозе 0,05 куб.см 1 раз в день в течение 3 дн подряд перед заражением.

3.7. Результат исследования считают положительным в случае обнаружения и дифференциации токсоплазм в патологическом материале.

3.8. Токсоплазм необходимо дифференцировать от саркоцист, безноитий, лейшманий, неоспор, энцефалитозоон. Дифференциация основана на изучении морфологии возбудителей, их локализации, патогенности для белых мышей, круга хозяев. При определении возбудителя пользуются таблицей.

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

2. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОГО НАБОРА

Симптомы и лечение токсоплазмоза у кошек

Следующий материал будет актуален для владельцев домашних животных. Сегодня мы поговорим о симптомах токсоплазмоза у котов. Данное заболевание очень коварно, так как долгое время может себя никак не проявлять. В некоторых случаях токсоплазмоз протекает в острой форме, и тогда симптомы заболевания выражены достаточно ярко: животное может стать вялым, сонливым, могут появляться расстройства желудка, а также нервные судороги и параличи. Подробнее о симптомах токсоплазмоза у кошек читайте в следующей статье.

Токсоплазмоз – широко распространённое паразитарное заболевание животных и человека, возбудителем которого являются простейшие внутриклеточные микроорганизмы. Кроме человека, кошек и собак, им заражаются все млекопитающие животные, а также птицы. К токсоплазмозу животные восприимчивы независимо от возраста, но молодняк и старые животные более подвержены заболеванию.

Что же за зверь такой – токсоплазма? Это простейшие внутриклеточные паразиты, напоминающие под микроскопом дольки апельсина. Цисты – мешочки с токсоплазмами — попадают в почву через фекалии заболевших кошек, и уже оттуда с водой, землей, ветром, с пылью на обуви и колесах автомобилей распространяются дальше. С загрязненным землей кормом эти цисты попадают в организм других животных – собак, мышей, крыс, а также сельскохозяйственных, мясо которых затем идет в пищу.

Токсоплазма — один из тех паразитов, которые могут через плаценту проникать в развивающийся плод, вызывая выкидыши, мертворождения, врожденные патологии у младенцев.

Кошачьи — основные хозяева токсоплазмы, потому что именно в них происходит половое размножение паразита. Человек и другие животные являются промежуточными хозяевами для бесполового размножения токсоплазмы.

Последующие эксперименты показали, что только больные коты могут выделять цисты токсоплазмы с фекалиями, в отличие от других животных и человека. Дурная слава к кошачьим пришла после того, как на некоторых изолированных островах, где не было кошек, в природной среде не нашли токсоплазму. Вакцинация котов, живущих на американских фермах, понизила уровень распространения токсоплазмоза у мышей и свиней. Это доказали исследования 1999 года.

Такой высокий риск объясняется не только высоким уровнем заражения токсоплазмой сельскохозяйственных животных, но и спецификой путей заражения животных. Чтобы заразиться, свиньям, мышам и человеку достаточно проглотить одну ооцисту токсоплазмы, в то время как даже сто ооцист не заразят кота. Ооцисты очень стойки к окружающей среде, поэтому могут храниться и не терять способность заражения до 18 месяцев.

Существует три стадии жизненного цикла токсоплазмы, которые характеризуются разными морфологическими формами паразита:

• оосциды содержат по два спороциста и четыре спорозоита. Они опасны для людей — заражение происходит из-за наличия этой формы в фекалиях кота. Ооцисты вырабатываются только кошачьими. Насекомые (тараканы, мухи) могут переносить ооцисты на пищу, посуду, бытовые приборы — по всему дому. Ооцисты устойчивы ко многим факторам окружающей среды;
• быстро делящаяся форма тахизоитов — это процесс размножения токсоплазмы в организме человека и животных. Эта форма токсоплазмы очень быстро погибает в неблагоприятных условиях.
• третья форма медленно растущих брадизоитов, которые часто называют псевдоцистами или просто цистами, хранится в тканях, обычно в мышцах, реже может быть в воде и пище, и тоже опасна для человека. Заражение котов происходит чаще всего именно через эту форму токсоплазмы — после поедания больных мышей и птиц. Попадание всего одного брадизоита в желудочно-кишечный тракт кошки может заразить ее, что приведет к выделению огромного количества ооцист в окружающую среду.

Многие коты, гуляющие на улице, инфицируются токсоплазмозом еще в детстве. Домашняя кошка тоже может заразиться, даже не выходя за пределы квартиры. Как? Просто употребляя сырое мясо зараженного животного или через песок, который мы, так или иначе, приносим в дом на обуви. Но не спешите оставлять без крова любимую Мурку и выбрасывать ее на улицу!

Самый главный довод в защиту кошек – это то, что кошка опасна лишь две-три недели после инфицирования. Потом болезнь переходит в хроническую стадию, и токсоплазмы больше не выделяются! К тому, же если кошачий туалет убирается ежедневно, то это существенно снижает риск заболевания.

Так как паразиты имеют инкубационный период 1-5 дней. Млекопитающие (в том числе и человек) служат для паразита лишь промежуточным хозяином. То есть, если у вас живет кот, то, скорее всего, вы уже перенесли токсоплазмоз и имеете к болезни пожизненный иммунитет! Бояться нечего! К тому же статистика (вещь – упрямая) говорит, что чаще всего люди заражаются именно через мясо, а не от кошек.

Токсоплазмоз регистрируется на всех континентах. Характерно наличие природных очагов и периодические вспышки заболевания. В России встречается в Петербурге, в Ленинградской области.

От больного животного токсоплазмы выделяются повсеместно:со слюной;выделениями из глаз, носа, половых органов;с мочой и фекалиями.

У самок паразиты могут выделяться с молоком, а также проникают через плаценту, заражая плоды.

Симптомы острой формы токсоплазмоза проявляются через 2-3 дня после заражения:у самок – аборт в первой половине беременности, рождение нежизнеспособного приплода, котят с врожденными уродствами (гидроцефалия, недоразвитие конечностей)повышение температуры тела до 41 °С, сильная дрожь и угнетение (кошка не ест и не пьет).коньюктивит и гнойный ринит;упорная диарея с выделением крови и слизи, рвота, болезненность живота при пальпации;слизистые бледные или синюшные;тахикардия и частое дыхание;судороги, параличи.

Острая форма болезни может привести к гибели. Хроническое течение характеризуется истощением животного, поносами, нестабильным аппетитом и лихорадкой. У кошек токсоплазмоз и вовсе может протекать скрыто, не вызывая никаких симптомов.

Кошка может подхватить данную инфекцию где угодно. К примеру, облизывая лапу, съев заражённую мышь, корм, загрязненный фекалиями больных животных, на улице, сырое мясо, содержащее токсоплазмы.

В одном случае токсоплазмы в организме у кошки размножаются в тонком кишечнике, формируя цисты, которые выходят наружу с фекалиями. Именно здесь, когда человек будет убирать кошачий лоток, есть риск заражения. Опять-таки, паразиты, которые образуются у кошки в кишечнике, созреют в фекалиях и станут инвазионными (заразными) только через некоторый промежуток времени от 1 до 5 суток. Поэтому вовремя убранный горшок снизит риск заражения. После заражения кошка выделяет инфекционные цисты около 3-х недель, затем этот процесс прекращается.

Токсоплазмоз может протекать в нескольких формах: латентной (скрытой); подострой;острой (тяжёлой).

• вялое состояние;
• сонливость;
• отсутствие аппетита;
• резкий сброс веса;
• выделения из глаз, носа;
• высокая температура;
• расстройства кишечного тракта (поносы, рвоты);
• нарушение центральной нервной системы (судороги, параличи).

Первые симптомы обычно незначительны и больше напоминают лёгкую простуду или простое отравление. Появление более значимых признаков заболевания происходит через несколько недель. Хотя даже на протяжении всего этого времени в фекалиях у кошки уже присутствуют цисты токсоплазмы. Поэтому стоит быть предельно внимательными. Со временем недомогание у кошки может исчезнуть вообще благодаря иммунитету, но инфекция так и останется в организме. Кошка не сможет никого заразить, возбудители заболевания так и останутся заключёнными в клетках организма. Болезнь станет хронической.

При любых признаках болезни кошку желательно отнести к ветеринару. Врач возьмёт у животного необходимые анализы и определит потребность в лечении.

Диагностика инфекционных заболеваний представляет определенную сложность в связи с большим разнообразием и появлением новых форм клинических проявлений инфекционной патологии.

Быстро выявить возбудителя и начать адекватную терапию — залог успеха при лечении инфекционного заболевания. Как специфические (сыворотки и глобулины), так и неспецифические противовирусные препараты (иммуномодуляторы) наиболее действенны при использовании в первые дни заболевания, впоследствии они малоэффективны. Ранняя диагностика позволяет своевременно начать терапию специфическими средствами или, напротив, не использовать препараты, противопоказанные при определенных патологиях.

В качестве материала для анализа требуется небольшое количество плазмы или сыворотки, смыв из прямой кишки или с конъюнктивы, назальные выделения. Технология экспресс — диагностики основана на взаимодействии патологического материала со специфическими составляющими на панели теста, результат можно оценить спустя 5-10 минут. Для проведения теста не требуется никаких специальных условий и ограничений.

В каких случаях показано использование экспресс — тестов:

Полностью излечить это заболевание невозможно, поэтому лечение направлено на устранение острых симптомов и переведение токсоплазмоза из тяжёлой стадии в хроническую. Перевод заболевания в стадию ремиссии не даёт хозяину животного расслабляться, так как кошку надо обследовать ежегодно. Лечение трудоемкое и длительное. У взрослых животных иммунитет уже сформирован, и они легче справляются с заболеванием.В зависимости от форм и стадии заболевания ветеринар подбирает противопаразитные препараты.

Лечению кошек при токсоплазмозе до сих пор уделялось крайне недостаточное внимание.

Для лечения кошек применяют химкокцид в дозе 24 мг/кг массы тела в течение 7 суток. Для профилактики дозу уменьшают и дают 12 мг/кг в течение 25 дней. Можно также применять сульфадимидин в дозе 100 мг/кг, внутрь. Целесообразно суточную дозу разделить на 4 части. Одновременно рекомендуется давать пириметамин в дозе 1 мг/кг в течение 1-2 недель. Применяют клиндамицин в дозе 100- 250 мг/кг массы тела.

Одновременно необходимо проводить симптоматическое лечение (сердечные средства, успокаивающие препараты и т.д.).

Кошка является окончательным хозяином токсоплазм и считается основным звеном в эпидемиологии этой болезни. Приведённые материалы показывают, что число положительно реагирующих на токсоплазмоз кошек в разных странах различное, как впрочем и количество у этих животных, выделяющих ооцисты.

Необходимо отметить, что в природе циркулируют штаммы токсоплазм неодинаковой вирулентности, что приводит часто к латентному течению болезни при заражении животных.

Далее с появлением новых методов диагностики, например ПЦР, возникла необходимость сравнительного изучения существующих: РСК, РФА, полимеразной цепной реакции и копрологических методов исследования.

До настоящего времени также нет полной ясности по химиотерапии и химиопрофилактики кошек, больных токсоплазмозом, особенно по токсичности рекомендуемого для этой цели химкокцида.

Таким образом, становится очевидным необходимость изучения ряда вопросов по изучению серологического и клинического мониторинга указанной болезни у кошек .

Чтобы избежать заражения токсоплазмозом кошки и последующего заражения других питомцев или членов семьи, необходимо помнить о мерах предосторожности:

• кошачий лоток ежедневно чистят, его дезинфицируют 2 раза в неделю с помощью аммиачного раствора;
• при уборке фекалий из кошачьего лотка необходимо использовать перчатки;
• нужно следить за тем, чтобы кошка не ловила грызунов и птиц;
• сырое мясо для кормления не подходит;
• животное должно пить только кипяченую воду;
• необходимо регулярно обрабатывать питомца от блох;
• после общения с кошкой следует тщательно вымыть руки и лицо;
• мясо перед употреблением подвергают термообработке;
• поскольку токсоплазма нередко содержится на фруктах и овощах, их нужно всегда тщательно мыть;
• для разделки мяса следует приобрести отдельную доску и ножик; после контакта с сырым мясом следует тщательно помыть руки;
• беременным женщинам категорически запрещено ухаживать за кошкой.

Токсоплазмоз – серьезное заболевание, которое может принести огромный вред организму. По этой причине необходимо помнить о профилактических мерах. При обнаружении любых неприятных симптомов кошку нужно показать ветеринару и сдать необходимые анализы.

Читайте также: